Биология - Методы молекулярной биологии





F-плазмида - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

За конъюгативные свойства F-плазмиды отвечает tra-область генома, в которую входит 24 гена, сгруппированных в три оперона. За автономную репликацию F-плазмиды отвечают rep-гены. За распределение молекул плазмидной ДНК по... Просмотров: 10150



Qiagen - Методы молекулярной биологии - 28 мая 2011

Преобладающая часть продуктов распространяется как наборы, содержащие все компоненты, необходимые для приготовления образца и последующего анализа. Интегрированные решения позволяют автоматизировать и упростить... Просмотров: 11418



X-gal - Методы молекулярной биологии - 01 июня 2011

Ген lacZ может быть использован в качестве репортерного, при выращивания бактерии или дрожжей на среде, содержащей X-gal. В случае, когда промотор гена-мишени связан с кодирующей частью гена галактозидазы, связывание... Просмотров: 8580



Безлигазное клонирование - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Технология безлигазного клонирования позволяет сократить время создания новых генетических конструкций, например, для экспрессии рекомбинантного белка и наилучшим образом подходит для высокопроизводительной... Просмотров: 7582



Блоттинг - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Блоттинг — общее название методов молекулярной биологии по переносу определённых белков или нуклеиновых кислот из раствора, содержащего множество других молекул, на какой-либо носитель в целях последующего... Просмотров: 9267



Вектор (биология) - Методы молекулярной биологии - 16 апреля 2011

Процедуру клонирования можно также вести с помощью рестриктаз Sal I и Pst I. В первом случае процесс будет аналогичен, в последнем бактерии с модифицированными плазмидами будут, наоброт, чувствительны к ампициллину и... Просмотров: 8618



Вестерн блоттинг - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Вестерн-блоттинг был разработан в лаборатории Джорджа Старка в Стэнфорде. Название вестерн блот было дано технике У. Нейлом Бурнеттом и является игрой слов от названия Саузерн блоттинг, — методики определения ДНК,... Просмотров: 20795



Генная пушка - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Первая генная пушка была создана на основе автоматического забивателя гвоздей. Каплю порошка вольфрама с генетическим материалом наносили на пулю и выстреливали в чашку Петри, перед которой помещали пластину с... Просмотров: 10030



Гены домашнего хозяйства - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Транскрипция пластидных генов обеспечивается двумя типами РНК-полимераз, одна из которых кодируется ядром растительной клетки, в то время как другая — пластидной ДНК. Собственная РНК-полимераза пластид обладает... Просмотров: 10786



Гибридизация ДНК - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Соединение in vitro комплементарных одноцепочечных нуклеиновых кислот в одну молекулу. При полной комплементарности объединение происходит легко и быстро, а в случае частичной некомплементарности слияние цепочек... Просмотров: 9236



Дансил хлорид - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Коэффициент экстинкции дансил хлоридных производных аминокислот играет важную роль для определения концентрации производного в растворе. Дансил хлорид представляет собой один из простейших сульфониламидных... Просмотров: 9713



ДНК-микрочип - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

ДНК микрочипы используют для анализа изменения экспрессии генов, выявления однонуклеотидных полиморфизмов, генотипирования или повторного секвенирования мутантных геномов. Микрочипы отличаются по конструкции,... Просмотров: 9741



Зелёный флуоресцентный белок - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Зелёный флуоресцентный белок — белок, выделенный из медузы Aequorea victoria, который флуоресцирует в зелёном диапазоне при освещении его синим светом. В настоящее время ген белка широко используется в качестве светящейся... Просмотров: 10129



Капиллярный электрофорез - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Для проведения капиллярного электрофореза требуется относительно простое оборудование. Схема эксперимента представлена на рисунке 1. Основные компоненты системы -- флакон для нанесения образца, стартовый флакон,... Просмотров: 13828



Клонирование ДНК - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Генная терапия подразумевает введение работающего гена в клетки, в которых он отсутствует, что приводит к излечению болезни, связанной с отсутствием или неправильным функционированием гена. Генную терапию... Просмотров: 9366



Комплементарная ДНК - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Часто гены эукариот удается экспрессировать в клетках прокариот. В наиболее простом случае, метод предполагает встраивание эукариотической ДНК в геном прокариот, далее транскрипцию ДНК в мРНК и затем трансляцию мРНК ... Просмотров: 8197



Метод дробовика - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

При секвенировании методом дробовика ДНК случайным образом фрагментируется на мелкие участки, которые затем секвенируют обычными методами, например, методом Сэнгера. Полученные перекрывающиеся случайные фрагменты... Просмотров: 9742



Нокдаун гена - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

В случае кратковременного нокдауна, связывание олигонуклеотида с геном или транскриптами, понижает экспрессию из-за блокировки транскрипции, трансляции или деградации мРНК, также может нарушаться сплайсинг... Просмотров: 7615



Пероксидаза хрена - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Пероксидаза хрена представляет собой идеальный фермент для многих методик, так как имеет относительно небольшой размер, относительно стабильна и более дешева, чем альтернативы — например, щелочная фосфатаза. HRP... Просмотров: 12162



Планиграфия - Методы молекулярной биологии - 08 февраля 2011

Планиграфия в археологии — способ документирования археологического раскопа, когда найденные объекты представлены, как относящиеся к определенному горизонтальному электрометрическому срезу. Этот... Просмотров: 10095



Полимеразная цепная реакция - Методы молекулярной биологии - 08 февраля 2011

В момент изобретения метода Кэри Маллис работал химиком-синтетиком в компании Цетус, которая и запатентовала метод ПЦР. В 1992 году Цетус продала права на метод и патент на использование Taq-полимеразы компании Хофман-Ла... Просмотров: 19386



Полиморфизм длин рестрикционных фрагментов - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

При использовании данного исследования получаются различные результаты от различных образцов, и при помощи ПДРФ можно идентифицировать некоторые различия в последовательности нуклеотидов ДНК, в случае, когда они... Просмотров: 7728



Праймер - Методы молекулярной биологии - 08 февраля 2011

Многие лабораторные методы в биохимии и молекулярной биологии, которые предполагают использование ДНК-полимеразы, такие, как секвенирование или полимеразная цепная реакция, требуют наличие праймеров. Такие праймеры ... Просмотров: 8720



Протеиназа K - Методы молекулярной биологии - 05 августа 2011

В молекулярной биологии протеиназа К широко применяется для удаления белковой примеси в препаратах нуклеиновых кислот. Кроме этого, протеиназа К быстро расщепляет и инактивирует нуклеазы в препаратах ДНК или РНК.... Просмотров: 9330



ПЦР в реальном времени - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Часто ПЦР в реальном времени комбинируют с ОТ-ПЦР для измерения малых количеств мРНК, что позволяет исследователю получать количественную информацию о содержании данной мРНК в клетке и, соответственно, позволяет... Просмотров: 8045



ПЦР с обратной транскрипцией - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Одноцепочечную молекулу РНК превращают в реакции обратной транскрипции в комплементарную ДНК и далее амплифицируют уже одноцепочечную молекулу ДНК, используя традиционную ПЦР. RT-PCR не следует путать с ПЦР в реальном... Просмотров: 9380



Репортёрный ген - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Интересующий исследователя ген и ген-репортёр обычно встраивают в одну генетическую конструкцию, а затем вводят её в клетку или организм. В случае клеток бактерий и эукариот для введения обычно используют кольцевые... Просмотров: 8141



Саузерн блоттинг - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Другие технологии переноса, например, вестерн блоттинг, нозерн блоттинг, саузвестерн блоттинг используют сходные методы, но для определения РНК или белка в образце, и называются по образцу метода, придуманного... Просмотров: 10865



Флюоресцентная гибридизация in situ - Методы молекулярной биологии - 13 мая 2011

Для определения расположения специфической последовательности ДНК при флюоресцентной гибридизации in situ используют флюоресцентные метки, которые связываются только с определенными участками хромосом. Для... Просмотров: 8984



Футпринтинг ДНК - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

Своё название метод получил от английского слова «footprint», обозначающего отпечаток ноги или след. На диаграмме, получающейся после разгонки деградированной ДНК электрофорезом в полиакриламидном геле на месте... Просмотров: 8999



Эксперимент Гриффита - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

В настоящее время известно, что «трансформирующим началом» в эксперименте Гриффита была ДНК штамма III-S. Нагревание убивало бактерии, однако их ДНК оставалась интактной и в ходе эксперимента захватывалась бактериями... Просмотров: 10047



Эксперимент Эвери, Маклеода и Маккарти - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

В статье, опубликованной в феврале 1944 года в Журнале экспериментальной медицины, Эвери с соавторами показал, что ДНК, но не белки являлись веществом, определяющим наследственность у бактерий.... Просмотров: 11697



Электрофорез ДНК - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

После разделения фрагменты ДНК разной длины визуализируют при помощи флюоресцентных красителей, специфично взаимодействующих с ДНК, например, агарозные гели обычно красят бромистым этидием, который интеркалирует... Просмотров: 9360



Эндонуклеазы рестрикции - Методы молекулярной биологии - 09 февраля 2011

К 2007 году выделено более трех тысяч эндонуклеаз рестрикции. Более шестисот рестриктаз доступны в виде коммерческих препаратов и повседневно используются в лабораториях для модификации ДНК и решения генно-инженерных ... Просмотров: 11178



Бисульфитное секвенирование - Секвенирование - 09 февраля 2011

Другие методы вместо обработки бисульфитом для различения метилирования аллелей предполагают специфическую по метилированию рестрикцию и иммунопреципитацию метилированной ДНК. Метилирование ДНК было первой... Просмотров: 8066



Метод Сэнгера - Секвенирование - 09 февраля 2011

В современной интерпретации, метод обрыва цепи позволяет секвенировать за один этап последовательность ДНК длиной около 800-1000 нуклеотидов. Для сравнения, метод пиросеквенирования, разработанный в 1996 году, позволяет... Просмотров: 8858



Метод Эдмана - Секвенирование - 09 февраля 2011

ФИТЦ — реагент используемый для определения N-концевой аминокислоты в пептиде. Он способен реагировать с альфа-аминокислотами и альфа-карбоксильной группой свободных аминокислот. В результате взаимодействия с... Просмотров: 9765



Пиросеквенирование - Секвенирование - 09 февраля 2011

В настоящий момент, существуют некоторые ограничения в применения данного способа секвенирования. Лимитирующим фактором является длина последовательности нуклеотидов, которая составляет около 300-500 нуклеотидов, что ... Просмотров: 10479



Секвенирование - Секвенирование - 09 февраля 2011

В более современном варианте дидезоксинуклеотиды метят четырьмя разными флуоресцентными красителями и проводят ПЦР в одной пробирке. Затем во время электрофореза в полиакриламидном геле луч лазера в определенном... Просмотров: 8819