Биология - Метод локальной фиксации потенциала - Примеры записей, получаемых методом patch-clamp
09 февраля 2011Оглавление:
1. Метод локальной фиксации потенциала
2. Задача: исследование трансмембранных ионных токов
3. Методики изучения электрических свойств клеточной мембраны
4. Решение: patch-clamp, его варианты и конфигурации
5. Примеры записей, получаемых методом patch-clamp
6. Planar patch-clamp
Запись одиночного канала рецептора глицина. Чётко видны два состояния: закрытое и открытое. Канал время от времени спонтанно переходит из одного состояния в другое, промежуточных состояний нет. Запись позволяет получить две важнейшие характеристики канала: проводимость и вероятность нахождения в открытом состоянии. К слову, чаще всего активность канала физиологически регулируется путем изменения этой вероятности).
Запись в конфигурации whole-cell. Клетка эпителия собирательной трубки. Трансмембранный потенциал −60 мВ. С интервалами в 1 минуту на 30 секунд в омывающий раствор вводится амилорид — ингибитор эпителиального натриевого канала. Кстати, чувствительность к ингибиторам — это еще одна из важнейших характеристик канала. Введение амилорида всякий раз приводит к падению тока до нуля, из чего следует, что практически вся проводимость при −60 мВ в данной клетке — это проводимость эпителиального натриевого канала. В противоположность предыдущей записи, изменения тока выглядят непрерывными — это связано с тем, что одновременно записывается много каналов, соответственно, имеется примерно 2000 уровней тока — от «все открыты» до «все закрыты».
Просмотров: 15464
|
|