Биология - Фиксация в микроскопии - Типы фиксаторов
09 февраля 2011Оглавление:
1. Фиксация в микроскопии
2. Типы фиксаторов
3. Сноски
Универсальных фиксаторов, одинаково пригодных для любых целей, не существует. Выбор фиксирующего раствора основывается на его преимуществах и недостатках для работы с конкретным видом материала и пригодностью для конкретного метода микроскопического исследования.
Формалиновые
Наиболее распространенный тип фиксирующего раствора. Прост, дешев, относительно малоопасен для работающего. Используются водные растворы формальдегида в чистом виде, и в составе смесей с другими веществами, например, с уксусной кислотой. Недостаток формалиновых фиксаторов - излишнее уплотнение тканей.
Спиртовые
Чистый этиловый спирт используют в редких случаях, так как он может вызывать сморщивание материала.
- Смесь Шаффера — составляется из 2 частей 80% этилового спирта и 1 части формалина. Продолжительность фиксации 1 — 2 дня.
- Смесь Карнуа — из 6 частей абсолютного этилового спирта, 3 частей хлороформа и 1 части уксусной кислоты. Готовится непосредственно перед употреблением. Продолжительность фиксации 1/2 — 3 часа. Смесь пригодна для фиксации объектов, имеющих плотные оболочки.
- Жидкость Дитриха - смесь этилового спирта, формалина, уксусной кислоты и воды. Продолжительность фиксации 8 - 24 часа. Пригодна для членистоногих.
На основе пикриновой кислоты
Объекты, зафиксированные смесями на основе пикриновой кислоты, неустойчивы в воде, поэтому после фиксации объект переносят в 70% спирт. После фиксации объект приобретает желтую окраску, что обычно не мешает работе.
- Смесь пикриновой и уксусной кислот. Насыщенный растовр пикриновой кислоты в 10% уксусной. Пригодна для мелких и нежных объектов.
- Смесь Буэна. 15 частей насыщенного водного раствора пикриновой кислоты, 5 частей формалина, 1 часть уксусной кислоты. Продолжительность фиксации 2 часа. Затем объекты могут длительное время не портясь сохраняться непосредственно в растворе фиксатора.
Сулемовые
Осторожно! Яд! Портит металлические предметы.
Фиксирующие смеси на основе сулемы работают медленно. Применяются в гистологии. Хорошие ядерные фиксаторы .
Осмиевая кислота
Осторожно! Яд!
Фиксаторы на основе осмиевой кислоты мало изменяют структуру тканей и клеток. Хорошие ядерные фиксаторы. Окрашивают жиры в тёмный цвет . В электронной микроскопии применяется в качестве контрастного вещества. Чрезвычайная ядовитость и высокая цена ограничивают применение осмиевых фиксаторов.
Просмотров: 11261
|
|