Биология - Allium test - Микроскопические исследования и статистическая обработка
14 мая 2011Оглавление:
1. Allium test
2. История метода «Allium Test», преимущества перед другими методами и перспективы
3. Преимущества метода Allium cepa
4. Характеристика лука Allium cepa L., применимость в тестах
5. Методика проведения тестирования
6. Макроскопические исследования
7. Микроскопические исследования и статистическая обработка
8. Статистическая обработка данных
Расчет частоты мутаций
В Allium test для расчета частоты мутаций традиционно применяется метод ана-телофазного анализа частоты хромосомных аберраций. На стадии ана- телофазы регистрируются мутации, связанные с грубым нарушением структуры хромосом, а так же с повреждением митотического веретена или изменением поведения хромосом на веретене деления:
- отставания хромосом,
- аберрантные митозы:
- трёхполюсные митозы,
- четырёхполюсные митозы,
- несимметричные митозы.
Рекомендации
При оценке мутагенной активности химических веществ достаточно использовать лишь ана-телофазный анализ, то есть регистрировать мутации в фазах митоза, так как меристемы в течение всего опыта находятся в контакте с воздействующим фактором. Но при изучении мутагенной активности ЭМИ этого оказалось недостаточно, поскольку воздействию излучения корневые меристемы подвергаются лишь некоторый период времени. В промежутках между облучениями происходит преобразование индуцированных в анафазе и телофазе хромосомных фрагментов клетки выходят из митоза и переходят в интерфазу, а фрагменты становятся микроядрами. В результате эти мутации остаются неучтенными. В связи с этим была предложена модификация метода Allium test, которая позволяет учитывать всю сумму мутаций. На одном препарате было рекомендовано применять ана-телофазный анализ и микроядерный тест. При этом анализируется вся совокупность клеток, что позволяет избежать ложноотрицательных ответов и дает более достоверные результаты .
Расчет митотического и фазных индексов
Расчёт митотических индексов можно проводить на тех же препаратах, что и ана-телофазный анализ. Просматривается от 400 до 600 клеток. Подсчитывается общее количество делящихся клеток и отдельно клетки на разных стадиях митоза.
Обозначение фазы / индекса | Характеристика | Расчёт индекса |
---|---|---|
|
|
|
|
профаза
|
|
|
метафаза
|
|
|
анафаза
|
|
|
телофаза
|
|
|
ана- телофаза
|
|
Просмотров: 23326
|