Биология - Thermus aquaticus - Термостабильные ферменты
12 мая 2011Оглавление:
1. Thermus aquaticus
2. Биологические свойства
3. Термостабильные ферменты
4. Применение
T. aquaticus является экстремально-термофильной бактерией, поэтому ферменты T. aquaticus термостабильны и не инактивируются при повышенных температурах. Некоторые ферменты T. aquaticus активно используются в качестве инструментов для молекулярно-генетических исследований.
Альдолазы
Первоначально не было понятно, как T. aquaticus может выживать в экстремальных температурных условиях, поэтому необходимо было детально изучить ферменты T. aquaticus и как они избегают денатурации при таких повышенных температурах. Одними из первых изученных ферментов T. aquaticus были альдолазы.
РНК-полимераза
Первым полимеразным ферментом, выделенным из T. aquaticus была РНК-полимераза в 1974 г. Проведены кристаллографические исследования данного фермента и получена рекомбинантная РНК-полимераза, предназначенная для молекулярно-биологических исследований транскрипции.
Taq1-рестриктаза
Рестриктаза Taq1 была одним из первых ферментов T. aquaticus, использовавшихся для молекулярно-генетических исследований. Сайт рестрикции — TCGA.
Taq полимераза
Taq полимераза была впервые выделена в 1976 г.. Преимуществами Taq полимеразы является её способность работать при повышенных температурах и возможность получать Taq полимеразу в чистом виде. В 1986 г. Кери Маллис решил использовать для изобретённой им в 1983 г. полимеразной цепной реакции Taq полимеразу ввиду того, что она выдерживала высокую температуру, необходимую для денатурации ДНК и не было необходимости вносить новую порцию дорогостоящей ДНК-полимеразы после каждого раунда амплификации. Затем ген Taq полимеразы был клонирован и модифицирован с целью получить высокоэффективный коммерческий продукт. Taq полимераза гомологична ДНК-полимеразе I Escherichia coli. Taq полимераза также ограниченно используется в секвенировании ДНК, но ввиду большого количества ошибок в секвенировании и точных анализах чаще используется Pfu полимераза из археи Pyrococcus furiosus.
Просмотров: 11433
|
|