Биология - Конфокальный микроскоп

09 февраля 2011


Оглавление:
1. Конфокальный микроскоп
2. Преимущества в биологии перед другими микроскопами



Современный конфокальный микроскоп

оптический микроскоп, обладающий значительным контрастом по сравнению с обычным микроскопом, что достигается использованием апертуры, размещённой в плоскости изображения и ограничивающей поток фонового рассеянного света. .

Эта методика завоевала популярность в научных исследованиях в биологии, физике полупроводников и спинтронике.

История

В 50-х годах биологам понадобилось увеличить контраст наблюдения меченых флюорохромами объектов в толстых срезах тканей. Для разрешения этой проблемы профессор Массачусетского технологического института США, Марвин Минский предложил использовать для флуоресцентных микроскопов конфокальную схему. В 1961 г. Минский получил на эту схему патент .

Принцип работы

Cхема конфокального микроскопа. Рассеянный свет, идущий из глубины образца, отрезаются апертурами, что обеспечивает высокий контраст изображения

Конфокальный микроскоп имеет разрешение ~\delta такое же как и обычный микроскоп и ограничено оно дифракционным пределом.

~\delta = \frac{\lambda}{\pi}

где ~\lambda длина волны излучения, ~ = n \sin\alpha — числовая апертура объектива, ~n — показатель преломления среды между образцом и объективом, ~\alpha — половина угла, который «захватывает» объектив. В видимом диапазоне разрешение составляет ~ 250 нм Однако, в последние годы успешно развиваются схемы микроскопов, которые используются нелинейные свойства флуоресценции образцов. В этом случае достигается разрешение значительно меньшее дифракционного предела и составляет ~ 3—10 нм .

Конфокальный микроскоп создаёт чёткое изображение образца, которое при использовании обычного микроскопа представляется размытым. Это достигается путем отрезания апертурой фонового света идущего из глубины образца, то есть того света, который не попадает на фокальную плоскость объектива микроскопа. В результате изображение получается с контрастом лучшим, чем в обычном оптическом микроскопе.

Изображение представляет собой двумерную картину.



Просмотров: 7570


<<< Кантилевер
Критерий Дейвса >>>