Биология - Гибридизация ДНК

09 февраля 2011


Оглавление:
1. Гибридизация ДНК
2. Саузерн-блоттинг и нозерн-блоттинг



соединение in vitro комплементарных одноцепочечных нуклеиновых кислот в одну молекулу. При полной комплементарности объединение происходит легко и быстро, а в случае частичной некомплементарности слияние цепочек замедляется, что позволяет оценить степень комплементарности. Возможна гибридизация ДНК-ДНК и ДНК-РНК.

Протокол эксперимента

  1. Двуцепочечную ДНК разогревают в соответствующем буфере.
  2. Из-за изменения внешних условий, водородные связи между комплементарными азотистыми основаниями становятся термодинамически невыгодными и цепочки расходятся.
  3. Препарат денатурированных ДНК затем смешивается с другой денатурированной ДНК.
  4. Препараты далее медленно охлаждаются, при этом одноцепочечные ДНК отжигаются друг на друга, при этом образуется «гибридная» молекула ДНК.

Анализ скорости отжига одноцепочечных ДНК позволяет оценивать сходства и различия в последовательностях ДНК между видами или особями одного вида.



Просмотров: 7992


<<< Дансил хлорид