Биология - Фиксация в микроскопии - Типы фиксаторов

09 февраля 2011


Оглавление:
1. Фиксация в микроскопии
2. Типы фиксаторов
3. Сноски



Универсальных фиксаторов, одинаково пригодных для любых целей, не существует. Выбор фиксирующего раствора основывается на его преимуществах и недостатках для работы с конкретным видом материала и пригодностью для конкретного метода микроскопического исследования.

Формалиновые

Наиболее распространенный тип фиксирующего раствора. Прост, дешев, относительно малоопасен для работающего. Используются водные растворы формальдегида в чистом виде, и в составе смесей с другими веществами, например, с уксусной кислотой. Недостаток формалиновых фиксаторов - излишнее уплотнение тканей.

Спиртовые

Чистый этиловый спирт используют в редких случаях, так как он может вызывать сморщивание материала.

  • Смесь Шаффера — составляется из 2 частей 80% этилового спирта и 1 части формалина. Продолжительность фиксации 1 — 2 дня.
  • Смесь Карнуа — из 6 частей абсолютного этилового спирта, 3 частей хлороформа и 1 части уксусной кислоты. Готовится непосредственно перед употреблением. Продолжительность фиксации 1/2 — 3 часа. Смесь пригодна для фиксации объектов, имеющих плотные оболочки.
  • Жидкость Дитриха - смесь этилового спирта, формалина, уксусной кислоты и воды. Продолжительность фиксации 8 - 24 часа. Пригодна для членистоногих.

На основе пикриновой кислоты

Объекты, зафиксированные смесями на основе пикриновой кислоты, неустойчивы в воде, поэтому после фиксации объект переносят в 70% спирт. После фиксации объект приобретает желтую окраску, что обычно не мешает работе.

  • Смесь пикриновой и уксусной кислот. Насыщенный растовр пикриновой кислоты в 10% уксусной. Пригодна для мелких и нежных объектов.
  • Смесь Буэна. 15 частей насыщенного водного раствора пикриновой кислоты, 5 частей формалина, 1 часть уксусной кислоты. Продолжительность фиксации 2 часа. Затем объекты могут длительное время не портясь сохраняться непосредственно в растворе фиксатора.

Сулемовые

Осторожно! Яд! Портит металлические предметы.

Фиксирующие смеси на основе сулемы работают медленно. Применяются в гистологии. Хорошие ядерные фиксаторы .

Осмиевая кислота

Осторожно! Яд!

Фиксаторы на основе осмиевой кислоты мало изменяют структуру тканей и клеток. Хорошие ядерные фиксаторы. Окрашивают жиры в тёмный цвет . В электронной микроскопии применяется в качестве контрастного вещества. Чрезвычайная ядовитость и высокая цена ограничивают применение осмиевых фиксаторов.



Просмотров: 9818


<<< Окраска по Шморлю I
Escherichia coli O104:H4 >>>